色谱剖析-第四章色谱的定性和定量剖析
已知纯样的t R直接对照定性办法的依据是色谱条件严厉不变时，任一组分都有必定的保存值。此法的牢靠性与别离度有关。例如峰许多，靠的很近（酒、茶叶、石油等）用t R定性禁绝。由于同一保存时刻或许对应许多化合物，即使是色谱条件严厉不变，也不能扫除有数种化合物与之对应的或许性。因而单靠保存时刻定性不是彻底牢靠的。
(一)柱前衍生化法:例如酮，参加2，4-二硝基苯肼，生成沉积，在谱图上消失。
(二)柱上衍生化法：如装有5A分子筛的前置柱，可吸附C3—C11的正构烷烃，KOH处理的石英粉，将羧酸和酚除掉等。
(三)柱后衍生化法：柱后流出物搜集后，参加特征试剂与其反响，可对不知道物定性。剖析化学中所学的一切办法都可运用。
4．保存指数与化合物结构的相关性要比其它保存值强，因而有利于判别化合物结构。
测保存指数时，柱子与柱温要与文献规则相同。还要有正构烷烃纯样，可供查阅的文献值太少，LC不能用柯瓦指数。
（4-3）用比保存体积Vg定性不用纯样，可是核算杂乱，要求精确称出固定液分量。假如固定液丢失，则定性禁绝。
峰面积是色谱图供给的根本定量数据，峰面积丈量的精确与否直接影响到定量成果。关于不同峰形的色谱峰要选用不一样的丈量办法。
关于不对称峰的丈量如仍用峰高乘以半峰宽，差错就较大，因而选用峰高乘均匀峰宽法。
（4-12）式中，W i、W S别离为被测物和规范物混合物中的质量百分含量（质量分数），f m指单位峰面积所代表组分的质量，最常用。
1．以正构烷烃为参比规范，把某组分的保存行为用两个紧接近它的正构烷烃来标定。这样使I x 值核算更为精确。
2．I x 值具有形象化特色。它是与被测物质具有相同调整保存时刻的设想的正构烷烃的碳数乘以100来标明的， I = 733 ，X = 7.33说明在该柱上，苯的保存值在庚与辛之间，相当于含有7.33个
2．运用参加法定性：将纯物质参加到试样中，调查各组分色谱峰的相对改变。便是参加纯样看哪个峰添加。当不知道样品中组分较多，所得色谱峰过密，用t R对照定性不易辨认时，可用此法。首要作出不知道样品的色谱图，然后在不知道样品参加某已知物，又得到一个色谱图。峰高添加的组分即或许为这种已知物。
3．测得I x值与文献值对照就可定性判定，而不用用纯物质相对照。保存指数仅与固定相的性质、柱温有关，与其它试验条件无关。只需柱温与固定相相同，其精确度和重现性都很好。
W1/2 = bt R a （4-10）同系物的半峰宽与保存时刻成正比，关于难于丈量半峰宽的窄峰、堆叠峰（未彻底堆叠），可用此法测定峰面积，关于填充柱a=0，峰尖、窄时，也可用bt R替代W1/2 :
相对校对因子f i是组分的肯定校对因子fi ’与规范物质的肯定校对因子fs ’之比。
式中m i、m S和A i、A s别离为被测物和规范物的质量（克数）和峰面积。
当m i、m S以摩尔为单位时，所得相对校对因子称为相对摩尔校对因子，用（f M）标明；当m i、m S用质量单位时，称为相对摩尔校对因子，以（f m），标明。
最近几年随核算机的运用，微处理机很多用到色谱仪上，能够更为精确地丈量峰面积核算混合物中各组分的含量。大都色谱仪都配有色谱工作站，可进行多种多样的色谱数据处理。国外的色谱工作站还可对色谱仪进行参数设定和操控。
为什么要用定量校对因子f？是由于不同组分有不同的呼应值。同一含量的不同组分，由于物理、化学性质的不同而在同一检测器上发生信号巨细不同，因而需校对。色谱定量剖析的依据是被测组分的量与其峰面积成正比。可是峰面积的巨细不只取决于组分的质量，而且还与它的性质有关。即当两个质量相同的不同组分在相同条件下运用同一检测器进行测守时，所得的峰面积却不相同。因而，混合物中某一组分的百分含量并不等于该组分的峰面积在各组分峰面积总和中所占的百分率。这样，就不能直接运用峰面积核算物质的含量。为了使峰面积能实在反映出物质的质量，就要对峰面积进行校对，即在定量核算中引进校对因子。
定量剖析的使命是求出混合样品中各组分的百分含量。色谱定量的依据是：组分的分量或在载气中的浓度与检测器的呼应信号成正比。即：
式中，W i为被测组分i的质量；A i为被测组分i的峰面积；f i为被测组分i的校对因子。
可见，进行色谱定量剖析时需求精确丈量检测器的呼应信号( 峰面积或峰高)；精确求得份额常数(校对因子)；正确挑选正真合适的定量核算办法，将测得的峰面积或峰高换算为组分的百分含量。
色谱剖析的的根本依据是保存时刻。在必定的色谱条件下，一个不知道物只要一个承认的保存时刻。因而将已知纯物质在相同的色谱条件下的保存时刻与不知道物的保存时刻作比较，就能够定性判定不知道物。若二者相同，则不知道物或许是已知的纯物质；t R不同，则不知道物就不是该纯物质。
保存指数又称为柯瓦（Kov áts ）指数，它标明物质在固定液上的保存行为，是现在运用最广泛并被国际上公认的定性目标。保存指数也是一种相对保存值，它是把正构烷烃中某两个组分的调整保存值的对数作为相对的规范，并假定正构烷烃的保存指数为n ?100。被测物的保存指数值可用内插法核算。是一种重现性较好的定性参数。
把二氯苯三个异构体和苯组成混合物，每种物质在混合物中的含量均为20%，然后在PME 色谱柱上别离并测定混合物中各组分的峰面积，数据如下：
相对保存值αis 是指组分i 与基准物质s 调整保存值的比值，它仅随固定液及柱温改变而改变，与其它操作条件无关。在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保存数据，可拿来进行定性判定
相对保存值测定办法：在某一固定相及柱温下，别离测出组分i 和基准物质s 的调整保存值，一般选简单得到纯品的，而且与被剖析组分附近的物质作基准物质，如正丁烷、环己烷、正戊烷、苯、对二甲苯、环己醇、环己酮等。再按下式核算即可。
如：1-丁烯与异丁烯在阿比松柱子上保存值相同。这时可选用双柱定性。二根柱的极性相差大时，一般保存值也相差大。若二根柱上t R不知道与t R已知都符合，则定性牢靠性就增一倍。
由于一组同系物保存指数I值与化合物沸点和碳数成直线联系。对同系物刁难比作图。图4-2是运用双柱定性。假如在二根不同的色谱柱上一起测定不知道物的保存指数I值，然后在此图上横、纵坐标上找到不知道物的保存指数I值，各画垂直于坐标轴的直线.二线相交处落在某化合物的直线上便是这类化合物。
一般指联机定性，例如色谱—质谱联用(GC–MS、LC–MS)；色谱—傅立叶改换红外光谱联用(GC - FTIR)；色谱—核磁共振联用(GC–NMR)。
色谱定性剖析便是要承认各色谱峰所代表的化合物。由于各种物质在必定的色谱条件下均有承认的保存值，因而保存值可作为一种定性目标。现在各种色谱定性办法都是依据保存值的。可是不同物质在同一色谱条件下，或许具有类似或相同的保存值，即保存值并非专属的。因而仅依据保存值对一个彻底不知道的样品定性是困难的。由于许多化合物或许在同一时刻流出色谱柱，因而只是依托气相色谱自身是不能对一个彻底不知道的化合物进行定性的。
气相色谱法是用载气将试样带入别离柱。各成分在柱中别离后用检测器测定，一般是不知道试样与规范試样的保存时刻及峰面积比较，进行定性定量剖析。色谱法别离较简单，往往是定性较困难。用t R定性时，因t R与分子结构有关，但两者间相关规则远未说明.由于色谱信息少，呼应信号缺少典型的分子结构特征，因而不能判定不知道的新的化合物，只能判定已知的化合物。
测定办法：将正构烷烃作为规范，规则其保存指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保存指数为600）。其它物质的保存指数是经过选定两个相邻的正构烷烃，其别离具有Z 和Z ＋1个碳原子。被测物质X 的调整保存时刻应在相邻两个正构烷烃的调整保存值之间，如图4-1所示。很多试验数据标明，化合物调整保存时刻的对数值与其保存指数间的联系绝大大都都是一条直线联系。因而可用内插法核算保存指数I X 。
研讨发现：大部分同系物的保存值的对数值与沸点、分子量、密度、黏度、折光指数、燃烧热、生成热等物理常数的对数值之间根本成线形联系。所以可凭借色谱法来测定这些物理常数。
例如FID检测器对有机物呼应，对某些H2O、H2S等无机物不发生信号；ECD对电负性强的物质有呼应;FPD对S、P化合物信号大。
但是当样品限守时，假如在了解样品的来历、性质、剖析意图的基础上，对样品组成作开始的判别，再结合下列的办法则可承认色谱峰所代表的化合物。气相色谱将变成一个强有力的东西。也能够终究靠比较气相色谱图来承认样品是否相同，例如油轮里的原油样品能够和海上浮油比较以承认油轮是否应对原油的走漏担任，GC关于扫除可疑性是很有用的，假如您从从前的试验中知道异辛烷在1.9 分钟出峰，那么一个在1.5分钟出的峰就不会是异辛烷，那么它是什么呢？走运的是您不用要考虑一切的有机物的样品信息，假如限制化合物规模。例如您不会希望在烷烃中找到苯系物，当一个不知道的峰被开始承认后，还必须在其他不同性质的色谱柱上重现以得到承认，假如一个化合物在依据沸点别离的柱甲基硅氧烷和聚乙二醇极性柱上有正确的保存时刻，此定性很或许便是正确的。GC在处理已知样品组分而且要求定量时是特别有用的。