仪器剖析第十章色谱法导论 PPT

  第一节 概述 色谱法也叫层析法,它是一种 高效能的和运用最广的物理或物理 化学别离技能,将它用于剖析化学 并合作恰当的查验测验手法,就成为色 谱剖析法。

  俄国植物学家M、Tsweet于1906年首 次提超卓谱法: 在一玻璃管中放入碳酸钙,将含有植物 色素(植物叶的提取液)的石油醚倒入 管中。

  20世纪30年代 离子交流色谱树立 1931年 库恩 奥地利化学家 胡萝卜素植物色素别离 40年代 Tiselius 吸附色谱与电泳 Martin 分配色谱、纸色谱和薄层色谱技能 50年代 Martin Synge 气-液色谱法 提出塔板理论 Van Deemter 提出速率理论 Golay 创造高效毛细管柱气相色谱 60年代 Horvathe 高效液相色谱法树立 80年代 离子色谱、超临界流体色谱、高效毛细管电

  (1)纸色谱法: 运用滤纸作载体,吸附在纸上的水作 固定相,样品点在滤纸一端,用活动相打开进行分 离的色谱办法。

  (2)薄层色谱法: 将固体吸附剂在玻璃板或塑料板 上制成薄层作固定相,采用与纸色谱相似的操作 进行别离的色谱办法。

  如图所示为一色谱流出曲线、基线:在试验条件下,色谱柱后仅有纯活动相 进入检测器时的流出曲线称为基线。基线在稳 定的条件下应是一条水平的直线。它的平直与 否可反应出试验条件的安稳状况。

  (3)薄膜色谱法: 将分子固定相制成薄膜,采用与纸 色谱相似的操作办法。

  2、分配色谱法: 运用不相同组分在两相间的分配 系数(或溶解度)的不同进行别离的办法。

  3、离子交流色谱: 运用溶液中不同离子与离子 交流剂间的交流才能的不同而进行别离的办法。

  4、尺度排阻色谱法:运用多孔性物质对不同巨细 的分子的排阻效果进行别离的办法。

  呈现峰极大值时的时刻,它与色谱柱的空地体积 成正比。因为该物质不与固定相效果,因而,其流

  在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,咱们把它叫做 固定相;另一相则不断流过固定相,咱们把它叫做活动相。

  色谱法的别离原理是运用待别离的各种组分在两相 中的分配系数、吸附才能、亲和才能等不同来进行别离 的。

  运用外力使含有样品的活动相(气体、液体)通过一 固定于柱中或平板上并与活动彼此不相溶的固定相外表。 当活动相中带着的混合物流经固定相时,混合物中的各组 分与固定相发生彼此效果。

  色谱法中,活动相可以是气体,也可以是液体,由此可分 为气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。固定相既可以 是固体,也可以是涂在固体上的液体,由此又可将气相色谱 法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液液色谱。分类状况如下:

  1、吸附色谱法: 运用吸附剂(固定相一般是固体) 外表对不同组分吸附才能的不同进行别离的方 法。

  从活动相带着组分进入色谱柱起就用检测器检测流 出柱后的流出物, 并用记载器记载信号随时刻改变的 曲线,此曲线就叫色谱流出曲线,当待测组分流超卓 谱柱时,检测器就可检测到其组分的浓度,在流出曲 线上表现为峰状,叫色谱峰。

  b、 保存时刻tR:试样从进样到呈现峰极大值时的时 间。它包含组分随活动相通过柱子的时刻tM 和组

  某组分的保存时刻扣除死Baidu Nhomakorabea间后 的保存时刻,它是组分在固定相中的停留时 间。即

  保存时刻为色谱定性根据。但同一 组分的保存时刻与流速有关,因而有时需用 保存体积来表明保存值。

  现在的色谱法早已不局限于色素的分 离,其办法也早已得到了极大的开展,但其 别离的原理仍然是相同的。咱们仍就叫 它色谱剖析。

  因为混合物中各组分在性质和结构上的差异, 与固定相之间发生的效果力的巨细、强弱不同, 跟着活动相的移动,混合物在两相间通过重复多 次的分配平衡,使得各组分被固定相保存的时刻 不同,然后按必定次第由固定相中先后流出。与 恰当的柱后检测的新办法结合,完成混合物中各组分 的别离与检测。