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仪器分析的个人总结docx

发表时间:2023-10-13 06:09:43 来源:新闻动态

  仪器分析个人总结 1、气相色谱 1、分离原理: 是混合物中各组分在两相间进行分配,其中一相是不动的,称为固定相,另一相是携带混合物流过此固定相的流体,称为流动相。当流动相中所含混合物经过固定相时,就会与固定相发生作用。由于各组分在性质和结构上的差异,与固定相发生作用的大小,强弱也有差异,因此在同一推动力作用下,不同组分在固定相中的滞留时间有长有短,从而按先后不同的次序从固定相中流出。 2、几个重要的值 死时间:tM保留时间:tR 调整保留时间:tR’=tR?tM 相对保留值:r12 = tR1’tR2’ 标准偏差:σ 半峰宽度:Y12=σ峰底宽度:Y=4σ分配系数:K = cScM 分配比:k= mSmM K=k×β 滞留因子:RS L = tMtR = 塔板理论n=H H有效作为柱效能指标H有效= n有效 分离度:R Ln有效 tR’2tR’2 ==16 12=R2 t ’?tR1’ 1+Y2) ,分离度是柱效能、选择性影响因素的总和,故可 用其作为色谱柱的总分离效能指标。 选择性系数:3、固定液的要求 挥发性小;耐热性好; 对试样各组分有适当的溶解度;具有较高的选择性;化学稳定性高。4、检测器 热导池 氢火焰离子化电子俘获火焰光度 要求:响应快,灵敏度高,稳定性高,线性范围宽,通用范围好。5、保留指数 log?????log???? I=100(+Z) ??+1?? 6、定量 归一化法: ???????? ????=???? 内标法 Aim内标 wi=??????×100% 内标7、相似相溶 极性分子间的电性作用,使得极性分子组成的溶质易溶于极性分子组成的溶剂,难溶于非极性分子组成的溶剂;非极性分子组成的溶质易溶于非极性分子组成的溶剂,难溶于极性分子组成的溶剂。 2、液相色谱 1、特点 三高一广一快: 高压、高效、高灵敏度,高速,可以测定75-80%的有机物。2、六大分离原理 液-液分配色谱:可以分离各种有机无机物液-固色谱: 可以分离中等相对分子质量的油溶性物质离子对色谱:可以分离碱 离子交换色谱: 可以分离无机化合物、有机化合物和生物分子离子色谱: 可以分离无机化合物、有机化合物和生物分子空间排阻色谱:可以分离高分子 2、选择流动相时应注意的因素 流动相纯度要高 应避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂对试样要有适宜的溶解度溶剂的粘度小些为好 应与检测其相匹配3、梯度洗提 流动相中含有两种或两种以上不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变流动相中溶剂的配比和极性,通过流动相中极性的变化来改变被分离组分的容量因子k和选择性因子,以提高分离效果。 4、检测器紫外光度荧光示差折光电导 4个中唯有示差折光不能用梯度洗提。 3、电位 1、测定原理 对电位差进行分析测定2、能斯特方程 ???? E=K+?log??± ???? E=K??p??试 3、膜电位 膜电位的建立证明主要是溶液中的例子与电极膜上离子之间发生交换作用的结果。4、选择性系数 ????,j=???? 5、标准加入法 用标准溶液滴加待测试液,计算前后差别。 ???????? ????=??Δ ?1 ??外?????=iR 2、定量 测电流: ????=Kc 扩散电流方程: ????=607n??12??23??16?? 直接比较法: 测定两个溶液的波高进行比较 ?x ????=????? ?? 标准加入法: ???=K??????????????? ????= ????3、干扰电流及消除方法 残余电流 一、原因: 溶液中滴汞电极上存在微量杂质和存在电容电流。二、解决方法: 提高极谱分析的灵敏度。迁移电流 一、原因: 待测离子向电极表面的移动受扩散力作用和电场库仑力作用。二、解决方法:加入支持电解质。极大 一、原因: 滴汞电极毛细管末端对滴汞上部有屏蔽作用而使被测离子不易接近,滴汞下部 被测离子则无阻碍地接近,因而在离子还原时,滴汞下部的电流密度将较上部为大,这种电荷分布的不均匀会引致滴汞表面张力部分运动,这种电荷分布不均匀会引致滴汞表面张力的不均匀,表面张力小的部分要向表面张力大的部分运动,这种切向运动会搅动滴汞附近的溶液,加速被测离子的扩散和还原而形成极大电流。 二、解决方法: 加入少量极大抑制剂。氧波 一、原因: 溶解氧在滴汞电极上被还原而产生的两个极谱波。二、解决方法加入少量亚硫酸钠 5、库仑 1、法拉第电解定律 ???? m= Q=it 6、原子发射光谱 1、波长区域 Γ射线-200nm近紫外区200-380nm可见区380-780nm近红外区μm中红外区μm远红外区50-1000μm微波无线、ICP光源 特征 一、ICP的工作温度比其他光源高。 二、ICP是涡流态的,且在高频发生器频率较高时,等离子体因趋肤效应而形 成环状。 三、ICP中电子密度很高。四、ICP是无极放氧。 五、ICP的载气流速较低。 六、ICP一般以氩气作工作气体。 3、定性 灵敏线 各种元素谱线中最容易激发或激发电位较低的谱线。铁谱线 将各个元素的分析线按波长为指标插在铁光谱图上。4、变宽效应 自然宽度 在无外界影响下,谱线仍有一定宽度多普勒变宽 原子在空间做无规则热运动所导致压力变宽 吸光原子与蒸汽中原子或分子相互碰撞而引起的能级稍微变化,是发射或吸光量子 1仪器分析概述 分析化学 定义 分析化学是指发展和应用各种方法、仪器和策略,获得有关物质在空间和时间方面组成和性质信息的一门科学,是化学的一个重要分支。任务 分析化学的主要任务是鉴定物质的化学组成、测定物质的有关组分的含量、确定物质的结构和存在形态及其与物质性质之间的关系等,属于定性分析、定量分析和结构分析研究的范畴。 ①确定物质的化学组成——定性分析②测量试样中各组份的相对含量——定量分析 ③表征物质的化学结构、形态、能态——结构分析、形态分析、能态分析④表征组成、含量、结构、形态、能态的动力学特征——动态分析分类 根据分析任务、分析对象、测定原理、操作方法和具体要求的不同,分析方法可分为许多种类。 ①定性分析、定量分析和结构分析 ②无机分析和有机分析 ③化学分析和仪器分析 ④常量分析、半微量分析和微量分析 ⑤例行分析和仲裁分析 特点 分析化学是一门信息的科学,现代分析化学学科的发展趋势和特点可归纳为如下几个方面: ①提高分析方法的灵敏度; ②提高分析方法的选择性及解决复杂体系的分离问题;③扩展物质的时间空间多维信息; ④对微型化及微环境的表征与测定;⑤对物质形态、状态分析及表征; ⑥对生物活性及生物大分子物质的表征与测定;⑦对物质非破坏性检测及遥测;⑧分析自动化及智能化。 仪器分析 仪器分析是化学学科得到一个重要分支,以物质的物理和物理化学性质为基础建立起来的一种分析方法。分类 仪器分析分为电化学分析、光化学分析、色谱分析、质谱分析、热分析法和放射化学分析法,详见下表。 特点 ①灵敏度较高:大多数仪器分析法适用于微量、痕量分析。如原子吸收分光光度法测定某些元素的绝对灵敏度可达10-14g,电子光谱甚至可达10-18g; ②取样量少:化学分析法需用10-1~10-4g,而仪器分析试样常在10-2~10-8g;③在低浓度下的分析准确度较高:含量在10-5%~10-9%范围内的杂质测定,相对误差仅为1%~10%; ④快速测定:如发射光谱分析法在1min内可同时测定水中48个元素;⑤可进行无损分析:有时可在不破坏试样的情况下进行测定,适于考古、文物等特殊领域的分析,有的方法还能进行表面或微区分析; ⑥能进行多信息或特殊功能的分析:有时可同时作定性、定量分析,有时可同时测定材料的组分比和原子的价态。放射性分析法还可作痕量杂质分析;⑦专一性强:如用单晶X衍射仪可专测晶体结构。用离子选择性电极可测指定离子的浓度等; ⑧便于遥测、遥控、自动化:可作即时、在线分析控制生产过程、环境自动监测与控制; ⑨操作较简便:省去了繁多化学操作过程,随自动化、程序化程度的提高操作将更趋于简化; ⑩仪器设备较复杂,价格较昂贵。评价指标 仪器分析方法的评价指标: ①精密度:指使用同一方法对同一试样进行多次测定所得结果的一致程度。②准确度:试样测量值和真实值相符合的程度。 ③标准曲线:被测物质的浓度或含量与仪器的响应信号之间的关系曲线。④灵敏度:表示物质单位浓度(或单位质量)的变化引起仪器响应信号变化的程度。从标准曲线可以得到方法的灵敏度,就是直线的斜率; ⑤检出限:某一方法在给定的置信水平水平上可以检测到的待测物质的最小质量或浓度。 2电化学分析 定义 电化学分析法又称为电分析化学法,应用电化学原理和实验技术,利用化学电池内被分析溶液的组成及含量与其电化学性质的关系建立起来的一类分析方法的总称。电化学分析方法灵敏度高,选择性好,设备简单,操作方便,应用范围广。 分类 根据测量的电信 号不同,电化学分析法可分为电位法、电解法、电导法和伏安法。 特点 ①分析速度快; ②灵敏度高:被测物质的最低量可以达到10-12mol/L数量级;③选择性好; ④仪器简单、经济,易于微型化:直接得到电信号,易传递,尤其适合于化工生产中的自动控制和在线分析; ⑤一般测量所得到的值是物质的活度而非浓度; ⑥应用广泛:传统电化学分析可用于无机离子分析、有机电化学分析、药物分析、活体分析等,从而在医学、生理上有较为广泛的应用; 1.光谱范围:仪器能测量光谱的波长范围。 2.工作范围:仪器能按规定的准确度和精密度进行测量的吸光度或强度范围。 3.厚度:样品池的两个平行且透光的内表平面之间的距离。 4.光路长度:光通过吸收池内物质的入射面和出射面之间的路程。当垂直入射时,应与厚度相同。 5.仪器的准确度:在不考虑随机误差的情况下,仪器给出的读数与被测量的真值相一致的能力。考察系统误差。 6.仪器的重复性:在不考虑系统误差的情况下,仪器对某一测量值能给出相一致读数的能力(短时间内)。 7.仪器的稳定性:在一段时间内,仪器保持其精密度的能力 8.仪器的可靠性:仪器保持其所有性能(准确度、精密度和稳定性)的能力。 1仪器分析:是指通过测量物质是某些物理或者物理化学性质`参数及其变化来确定物质的组成成分含量级化学结构的分析方法。 2定性分析:鉴定式样由哪些元素、离子、基团或化合物组成,即确定物质的组成。 3定量分析:试样中各种组分(如元素、根或官能团等)含量的操作。 4精密度:指同一分析仪器的同一方法多次测定所得到数据间的一致程度,是表征随机误差大小的指标,亦成为重复测定结果随测定平均值的分散度,即重现性。 5灵敏度:仪器或分析方法灵敏度是指区别具有微小浓度差异分析物能力的度量,它取决于两个因素:即校准曲线的斜率和仪器设备的重现性或精密度。 6检出限:又称检测下限或最低检出量,指一定置信水平下检出分析物或组分的最小量或最低浓度。它取决于分析物产生信号与本底空白信号波动或噪声统计平均值之比。 7动态范围:定量测定最低浓度的浓度范围。 8选择性:一种仪器方法的选择性是指避免试样中含有其它组分干扰组分测定的程度。 9分辨率:指仪器鉴别由两相近组分产生信号的能力。不同类型仪器分辨率指标各不相同,光谱仪器指将波长相近两谱线分开的能力;质谱仪器指分辨两相邻质量组分质谱峰的分辨能力;色谱指相邻两色谱峰的分离度;核磁共振波谱有它独特的分辨率指标,以临二氯甲苯中特定峰,在最大峰的半宽度为分辨率大小。 10分析仪器的校正:仪器分析中将分析仪器产生的各种响应信号值转变成被测物质的质量或浓度的过程称为校正。一般包括分析仪器的特征性能指标和定量分析方法校正。 11电磁辐射:电场和磁场的交互变化产生的电磁波,电磁波向空中发射或汇聚的现象,叫电磁辐射举例说,正在发射讯号的射频天线所发出的移动电荷,便会产生电磁能量。 12电磁辐射的吸收、发射、散射、折射、干涉、衍射: (4)折射折射是光在两种介质中的传播速度不同;(7)衍射光绕过物体而弯曲地向他后面传播的现象;13分子光谱、原子光谱 分子光谱:分子从一种能态改变到另一种能态时的吸收或发射光谱。原子光谱:是由原子中的电子在能量变化时所发射或吸收的一系列光所组成的光谱。 16透光率:透光率是指透过透明或半透明体的光通量与其入射光通量之比。 吸附色谱法:利用组分在吸附剂上的吸附能力强弱不同而得以分离的方法。 分配色谱法:利用组分在固定液中溶解度不同而达到分离的方法。 离子交换色谱法:利用组分在离子交换剂上的亲和力大小不同而达到分离的方法。 保留时间tR:试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间。 相对保留值r2,1:组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比。 分配系数K:指在一定温度和压力下,组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比值。 分配比k:指在一定温度和压力下,组分在两相间分配达平衡时,分配在固定相和流动相中的质量比。 分离度R:相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽总和之半的比值。 相对校正因子fi?:组分i的相对校正因子fi?为组分i与标准物质s的绝对校正因子之比。 内标法:将一定量的纯物质作为内标物加入到准确称量的试样中,根据试样和内标物的质量以及被测组分和内标物的峰面积求出被测组分的含量。 外标一点法:如校正曲线通过原点,可用外标一点法 对内标物的要求:样品中不存在的物质与被测组分完全分离,但保留时间接近;多种组分同时定量时,内标峰最好处于几个被测组分峰之间纯度高 浓度型检测器:测量组分浓度的变化的检测器,其响应值与组分的浓度成正比。 质量型检测器:测量组分质量流速变化的检测器,其响应值与单位时间进入检测器的组分质量成正比。 噪声RN:无样品通过时,由仪器本身和工作条件等偶然因素引起基线的起伏。 检测限:组分峰高为噪音二倍时的灵敏度。 梯度洗脱:在一定分析周期内不断变换流动相的种类和比例,使混合样品中各组分都以最佳平均k值通过色谱柱。适于分析极性差别较大的复杂组分 1固定相由层析基质组成,包括固体物质(如吸附剂、离子交换剂)和液体物质(如固定在纤维素或硅胶上的液体),这些物质能与相关的化合物进行可逆性的吸附、溶解和交换作用。 2流动相在色谱柱中存在着相对运动的两相,一相为固定相,一相为流动相。流动相是指在色谱过程中载带样品向前移动的那一相。在气相色谱中,流动相是气体,称为载气。在液相色谱中,流动相是液体,称为洗脱液或淋洗剂。流动相的作用是载带样品进入色谱柱进行分离,再载带被分离组分进入检测器进行检测,最后流出色谱系统放空或收集。 3色谱图/色谱流出曲线色谱柱流出物通过检测器系统产生的响应信号对时间或载体流出体积的曲线基线:色谱法中,经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。6色谱峰:当某组分从色谱柱流出时,检测器对该组分的响应信号随时间变化所形成的峰形曲线对称因子:对称因子为用于描述色谱图的对称性的物理量。对于单电子电极反应,反映电极电势对于其迁越步骤的正、逆向过程影响的参数,相当于正、逆向过程的对称性。 9死时间:流动相经色谱柱的平均时间定义为死时间,以tM表示,tM=L/u,L为柱长,u为流动相平均线调整保留时间溶质在固定相上滞留的时间,即保留时间减去死时间以tR’表示:tR’=tR-tMtM为死时间即流动相流经色谱柱的平均时间。tR为保留时间即溶质通过色谱柱的时间。 11保留体积从进样开始到色谱峰最大值出现时所通过的流动相体积。计算公式为:VR=tR·Fc 12峰高从色谱峰顶点到基线峰面积色谱图中色谱曲线与基线间包围的面积,也叫色谱峰面积。 14半峰宽色谱峰高一半处的宽度 16分配系数在平衡状态下,组分在固定液与流动相中的浓度之比。 17保留因子保留因子:溶质分布在固定相和流动相的分子数或物质的量之比,以k表示,老的文献一般称为容量因子或分配比。 18分配色谱法固定相与流动相均为液体;基本原理:组分在固定相和流动相上的分配; 流动相:对于亲水性固定液,采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定液的极性,反之,流动相的极性大于固定液的极性。正相与反相的出峰顺序相反; 固定相:早期涂渍固定液,固定液流失,较少采用; 化学键合固定相:表面的游离羟基上。C-18柱。19吸附色谱法吸附色谱法:吸附色谱法常叫做液-固色谱法,其固定相是一种吸附剂,利用其对试样中诸组分吸附能力的差异,而实现试样中诸组分分离的色谱法。 20分子排除色谱法分子排阻色谱法是根据分子大小进行分离的一种液相色谱技术。分子排阻色谱法的分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。按分子大小分离,小分子可以扩散到凝胶空隙,由其中通过,出峰最慢;中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过;而大分子被排斥在外,出峰最快;溶剂分子小,故在最后出峰。 22理论塔板数:N色谱的柱效参数之一,用于定量表示色谱柱的分离效率。N取决于固定相的种类、性质、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为:理论塔板数=(保留时间/2半高峰宽)2。 气相色谱法:气相色谱法是以气体为流动相的色谱法。当气化的被测物质随载气进入色谱柱时,基于被测物质在气相和固定相之间吸附-解吸附或分配差异进行分离。 1、TCD:是热导检测器,其设计依据每种物质都具有导热能力,组分不同则导热能力不同以及金属热丝具有电阻温度系数这两个物理原理,由于其结构简单,性能稳定,对无机和有机物都有响应,通用性好,且线性范围宽,因此是应用最广的气象色谱检测器之一。 2、FID(火焰离子化检测仪)是以氢气和空气燃烧的火焰作为能源,含碳有机物在火焰中燃烧产生离子,在外加的电场作用下,离子定向运动形成离子流,微弱的离子流经过高电阻,放大转换为电压信号被记录仪记录下来,或经A/D转换被计算机记录下来,得到色谱峰。 3、ECD电子捕获检测器,是一种用Ni或H做放射源的离子化检测器,主要用于检测较高电负性的化合物,如含素·硫·磷·氰基等,是一种高选择性,高灵敏度,对痕量电负性有机物最有效的检测器,已广泛用于农药残留分析, 缺点是线性范围窄,其测定结果重现性受操作条件和放射性污染的影响较大。 1高效液相色谱法:是在经典液相色谱法的基础上,引用了气相色谱法的理论和实验技术,以高压输送流动相,采用高效固定相及高灵敏度检测器,发展而成的现代液相色谱分析方法。它具有分离效率高、选择性好、分析速度快、检测灵敏度高、操作自动化和应用范围广的特点。633 2紫外吸收检测器简称紫外检测器,是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质,所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器,几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度,而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感,因此既可用于等度洗脱,也可用于梯度洗脱。 6溶剂强度参数:吸附色谱中,以溶剂作为流动相时,在选定的吸附剂上的洗脱能力的大小,相当于每一单位面积的吸附剂表面上溶剂的吸附能。溶剂强度参数表示溶剂在选定吸附剂上相对极性的大小,其数值大表明溶剂极性强。在不同吸附剂上,溶剂强度参数的大小不相同。 8化学键合相色谱:采用化学键合相作固定相的液相色谱法,利用化学反应通过共价键将有机分子键合在载体表面,形成均一、牢固的单分子薄层而构成的固定相。其分离机理为吸附和分配两种机理兼有。对多数键合相来说,以分配机理为主。通常,化学键合相的载体是硅胶,硅胶表面有硅醇基,≡Si–OH,它能与合适的有机化合物反应,获得各种不同性能的化学键合相。 9离子对色谱:离子对色谱是一种分离分析离子性溶质的色谱法。将一种(或多种)与溶质离子电荷相反的离子加到流动相中使其与溶质离子结合形成疏水性离子对化合物,使其能够在两相之间进行分配。1比移值:比移值(Rf值)是指溶质移动距离与流动相移动距离之比。Rf=L/L0L——原点至斑点中心的距离L0——原点至溶剂前沿的距离①Rf数值与组分及色谱条件和温度有关②实验中满足下列条件,可获得真实Rf值:展开槽密闭不泄露,薄层板周围空间被展开剂蒸汽所饱和,无边缘效应;沿分离轨迹固定相与流动相无梯度变化;展开剂的前沿位置能正确测定。2相对比移值:Rr=Rf(i)/Rf(s)=L(i)/L(s)与组分、色谱条件、参考物质有关。Rr值可以大于1,也可以小于1。 重现性和可比性均比Rf值好,能消除系统误差 3薄层色谱法:将吸附剂或载体涂布成一均匀薄层,点样,展开,斑点显色,进行定性定量。吸附薄层色 谱法和分配薄层色谱法 4薄层扫描法:用一定波长的光束照射展开后的薄层板,测定薄层色谱 斑点的吸光度A随展开距离a的变化,所记录的A-a曲线称为薄层色谱扫描图,利用薄层扫描图进行定量及定性分析的 方法成为薄层扫描法。 纸色谱法: 色谱纸的选择:对Rf值相差很小的化合物,宜采用慢速滤纸;对Rf值相差较大的化合物,则可用快速滤纸 展开剂的选择增加展开剂中极性溶剂的比例量,可以增大Rf值;增加展开剂中非极性溶剂的比例量,可以减少Rf值。 常用的展开剂水饱和的有机溶剂,如水饱和的正丁醇、正戊醇、酚等 操作步骤:点样、展开、显色、定性定量分析 边缘效应:同一物质在同一薄层板上出现中间部分的Rf值比边缘的Rf值小,这种现象称为边缘效应 10.分离度:相邻两色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽总和之半的比值,用R表示。分离度可以用来作为衡量色谱峰分离效能的指标。 13.化学键合固定相:是通过化学反应将有机分子键合在担体表面所形成固定相。 14.反相分配色谱:流动相极性大于固定相极性,极性大的先流出,适于非极性组分分离。 22.紫外—可见光谱:是由于分子中的价电子跃迁产生的。而每个电子能级上耦合有许多的振-转能级,所以处于紫外-可见光区的电子跃迁而产生的吸收光谱是带状光谱。 29.基频峰:分子吸收一定频率红外线,振动能级从基态跃迁至第一振动激发态产生的吸收峰 30.倍频峰:分子的振动能级从基态跃迁至第二振动激 发态、第三振动激发态等高能态时所产生的吸收峰 31.指纹区:在1350~650cm-1区域内,除单键的伸缩振动外,还有因变形振动产生的谱带。这种振动与整个分子的结构有关。当分子结构稍有不同时,该区的吸收就有细微的差异,并显示出整个分子特征。这种情况就像人的指纹一样,因此将该区域称为指纹区。 二:简答题 1.气相色谱仪包括哪些部分?各有什么作用? Ⅰ载气系统:气源、气体净化器、供气控、制阀门和仪表Ⅱ进样系统:进样器、汽化室 Ⅲ分离系统:色谱柱、控温柱箱Ⅳ检测系统:检测器、检测室Ⅴ记录系统:放大器、记录仪、色谱工作站 2.简述范第姆特方程式中A、B/u、Cu三项代表的物理意义及如何控制这些因素来提高柱效。 (1)涡流扩散项:A固体颗粒越小,填充越实,A项越小 .纵向扩散项:B/u控制因素:为降低纵向扩散,宜选用分子量较大的载气、控制较高线速度和较低的柱温 .传质项:C·u控制因素:减小填充物粒度、载气分子量及液膜厚度。固定液应完全覆盖载体表面但不可以太薄,否则柱子寿命短,k太小;T不可以超过固定液最佳使用温度。 11.试述塔板理论和速率理论的要点? 答:塔板理论反色谱柱看作一个蒸馏塔,借用蒸馏塔中“塔板”的概念来描述组分在两相间的分配行为.它的贡献在于解释色谱流出曲线的形状,推导出色谱流出曲线方程,及理论塔板数的计算公式,并成功地解释了流出曲线的形状及浓度极大值的位置,还提出了计算和评价柱效的参数。 速率理论提出,色谱峰受涡流扩散、分子扩散、气液两相间的传质阻力等因素控制,从动力学基础上较好解释影响板高的各种因素,对选择合适的操作条件具有指导意义.根据三个扩散方程对塔板高度H的影响,导出速率理论方程或称VanDeemter方程式: H=A+B/u+Cu 式中u为流动相的线速度;A,B,C为常数,分别代表涡流扩散项系数、分子扩散项系数、传质阻力项系数。 5.何谓红外吸收光谱法?简述红外吸收光谱产生的条件。 样品受到频率连续变化的红外光照射时,分子吸收其中一些频率的辐射,使振-转能级从基态跃迁到激发态,相应于这些区域的透射光强减弱,记录百分透过率T%对波数或波长的曲线,即为红外吸收光谱。 条件:辐射光子的能量应与振动跃迁所需能量相等。辐射与物质之间必须有耦合作用 6.高效液相色谱和气相色谱有何不同? 答:.分析对象的区别 GC:适于能气化、热稳定性高、且沸点较低的样品,占有机物的20%; HPLC:适于溶解后能制成溶液的样品,对分子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分子和离子型样品均可检测,占有机物的80% .流动相差别的区别 GC:流动相为惰性气体,组分与流动相无亲合作用力,只与固定相有相互作用。 HPLC:流动相为液体,流动相与组分间有亲合作用力,可梯度洗脱提高柱的分离选择性,且流动相种类较多,选择余地广。 .操作条件差别:GC:加温操作,可程序升温;HPLC:室温;高压,可梯度洗脱 9.简述高效液相色谱的主要类型原理及其应用。

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