图文]用高效液相色谱法测定对羟基苯甲酸酯类含量

  本文介绍了用反相高效液相色谱—紫外检测器进行色谱剖析，选用外标法定量，测定饮料、酱油、食醋、辣酱等食物中对羟基苯甲酸酯类含量，该测定方法具有可操作性、广泛的应用性和较高的精确性。

  关键词高效液相色谱法 对羟基苯甲酸酯类 外标法

  对羟基苯甲酸酯即尼泊金酯，首要种类有对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯，是新一代消毒灭菌防腐剂，它具有低毒、高效、用量少等长处，被广泛地应用于饮料、酱油、食醋、化妆品和医药等方面。现在，测定对羟基苯甲酸酯类含量的方法是依据GB/T5009.31-2003拟定的。该方法较为繁琐、费时，且样品处理不妥，对羟基苯甲酸酯就不能被彻底提取，影响检测成果的精确性。别的，该方法选用气相色谱法，仪器条件较难把握，尤其在无自动进样器的条件下，因而相同影响检测成果的精确性。笔者用反相高效液相色谱—紫外检测器进行色谱剖析，选用外标法定量，测定饮料、酱油、食醋、辣酱等食物中对羟基苯甲酸酯，方法回收率规模为97.4%～101.3％，成果令人满足。在2006年长三角地区农产品食物查验能力比对实验活动中，选用该方法查验测验对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯，取得满足定论。

  试样中对羟基苯甲酸酯用乙醇提取，通过离心，取上清液用0.45μm滤膜过滤供液相色谱仪测定，外标法定量。

   1.2.6规范储藏液：别离称取对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯100mg,用无水乙醇溶解定容至100ml，此溶液浓度为1mg/ml。

   称取均匀的样品5至15克（精确至0.01g）于100mL容量瓶中，加1mL1：1盐酸溶液混合，再参与50mL50%乙醇溶液，在超声波水浴中超声提取20分钟，用50%乙醇溶液定容至刻度,摇匀。用一次性注射器抽取必定体积的样品，用0.45μm有机相针式过滤头过滤，滤液供测定用。如样品为显着污浊液体，可用离心机沉积后，再过滤测定。

   依据保存时刻定性，外标峰面积法定量。对羟基苯甲酸酯含量按式（1）核算：

   3.1 对羟基苯甲酸酯浓度与其峰面积线.5剖析条件进行测定，每个规范点别离进样三次取平均值。以对羟基苯甲酸酯浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，得对羟基苯甲酸乙酯回归方程为y=0.00896x-0.422，其相关系数为0.9998对羟基苯甲酸丙酯回归方程为y=0.00975x-0.395，其相关系数为0.9998。

  称取10份未添加对羟基苯甲酸酯的饮料样品约10克，参与不同体积的100μg/mL对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯乙醇规范混合溶液，定容至100mL，用1.5剖析条件做回收率测定，实验数据见下表。

  取含有对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯的饮料样品10克（精确至0.01g）10份，按1.4方法来进行处理，按1.5剖析条件测定，平均值别离为132mg/kg、80.9mg/kg，得到对羟基苯甲酸乙酯规范偏差（σ）为0.711，变异系数（RSD）为0.00539；对羟基苯甲酸丙酯规范偏差（σ）为0.489，变异系数（RSD）为0.00604。

  2006年末,在参与长三角地区农产品食物查验能力比对实验活动中,笔者用此方法来进行对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯项目比对，比对定论为满足。