圆二色谱的数据要怎样剖析得到各个结构的份额呢？

  圆二色谱(简称CD)是使用最为广泛的测定蛋白质二级结构的办法，是研讨稀溶液中蛋白质构象的一种快速、简略、较精确的办法。它能够在溶液状况下测定，较挨近其生理状况。并且测定办法快速简洁，对构象改动活络，所以它是现在研讨蛋白质二级结构的首要手法之一，并已大规模的使用于蛋白质的构象研讨中。

  当平面偏振光经过具有旋光活性的介质时，可发生偏转发生左旋偏振光或右旋偏振光，且同一种旋光活性分子的两种构型对左旋和右旋圆偏振光的吸收系数(ε)不同（即εL≠εR），称为圆二色性。

  假如以吸收系数之差Δε=εL-εR为纵坐标作图，平面偏振光的波长λ为横坐标，得到的图谱便是圆二色谱，简称CD。

  CD谱因其搅扰少、简单测定而大规模的使用在测验手性小分子的肯定构型、大分子蛋白质和核酸的构象改动。

  一般小分子化合物是测定光学活性物质（待测物）在圆偏振光下的Cotton效应，依据Cotton效应的符号取得化合物发色团周围环境的立体化学信息，并与一个肯定构型已知、且结构相似的化合物的Cotton效应相比较，或许凭借核算化学的办法，比照试验测值和理论核算值，即或许推导出待测物的肯定构型。而大分子的立体结构较为杂乱，CD谱难以直接取得一级结构的构型，一般反映的是其二级或多级结构的构象信息。

  蛋白质是由氨基酸经过肽键衔接而构成的多级结构。结构中的肽键、芳香氨基酸残基、二硫桥键皆为光学活性基团，此外，蛋白质的二级、三级结构不同，其光学活性也受必定的影响。上述现象称为蛋白的圆二色性，在CD谱中遵从着必定的规矩。

  蛋白质的圆二色谱大体上分为两个波长规模：远紫外圆二色光谱和近紫外圆二色光谱。

  (1)185～245 nm为远紫外圆二色光谱，该区域是肽键的吸收峰波长，反映了生物大分子主链的构象信息（见图1）。α-螺旋结构在222nm、208nm处呈双负峰形，在190nm邻近有一正峰；β-折叠在217-218nm处有一负峰，在195-198nm处有一强的正峰；无规弯曲构象在198nm邻近有一负峰，在220nm邻近有一小而宽的正峰。选用蛋白质的远紫外CD光谱（208和222 nm）处的负波峰的增减，可估量蛋白的α-螺旋、β-折叠含量的改动。

  (2)245～320 nm为近紫外圆二色光谱：该区首要与侧链生色基团有关。如在250～260 nm为二硫键的吸收峰；在230～370nm为Trp、Tyr和Phe残基吸收峰。

  核酸是核苷酸单体聚合组成的极长的线状聚合物，由五碳糖、磷酸骨架和含氮碱基组成，并构成单螺旋或双螺旋结构。双螺旋结构又具有A、B和Z等构型，以B构型最为常见。

  核酸的CD信号首要由不对称的主链上的核糖分子及螺旋结构发生，其碱基和糖的类型、螺旋结构都会影响谱图特征，这便是CD谱用于研讨DNA/RNA构象的根底。如规范的B型DNA的CD谱在280nm有的正峰，在245nm为一负峰，该Cotton效应是由堆积的碱基电子跃迁偶极矩的巧合发生。

  因为核酸的实践测定值和理论核算的影响要素杂乱多样，核酸的CD谱一般只作为给定核酸二级结构的经验性辨认，但可做为监测DNA/RNA的结构改动的重要东西，如剖析小分子化合物与DNA相互作用的方法、新药研讨中辅佐挑选的东西等。

  多糖是由醛糖或酮糖经过脱水构成糖苷键，并以糖苷键线性或分支衔接而成的链状聚合物，其高档结构（二、三、四级）是经过非共价键方法在多糖主链间构成的有规矩构象。多糖中生色基的品种、空间取向、糖苷键链接方法、多糖空间构象决议了多糖CD谱的多样杂乱性。

  一是200nm以下的真空圆二色谱，需求选用特定的溶剂,以下降溶剂对光吸收的影响，该区域反映了多糖的链接方法和空间构象。

  二是200nm以上的诱导圆二色谱，适用于含有π电子功用基的糖类，或许需进行多糖衍生化后测定。