仪器剖析第六章 色谱剖析法

  • 色谱法是一种别离剖析技能。它是使用各 物质在两相中具有不一样的分配系数，当两 相作相对运动时，这些物质在两相中进行 屡次重复的分配来到达别离的意图 。

  • 色谱法以其具有高别离效能、高检测功能、 剖析时刻快速而成为现代仪器剖析办法中 使用最广泛的一种办法。

  色谱法或色谱剖析法，是一种别离剖析 技能，它使用混合物中各物质在两相间 分配系数的不同，当溶质在两相间作相 对移动时，各物质在两相间进行屡次分 配，然后使各组分得到别离。可完结这 种别离的仪器称为色谱仪。

  ➢色谱别离仪的根底原理和根本概念 ➢色谱别离的理论根底 ➢色谱定性和定量剖析的办法

  ➢别离效率高：杂乱混合物，有机同系物、异构体。 手性异构体。 ➢灵敏度较高：能够检测出μg.g-1(10-6)-ng.g-1(10-9) 级的物质量。 ➢剖析速度快：一般在几分钟或几十分钟内能够完成 一个试样的剖析。 ➢使用场景规模广：气相色谱：沸点低于400℃的各种有 机或无机试样的剖析。 ➢ 液相色谱：高沸点、热不安稳、生物试样的别离 剖析。 ➢不足之处：被别离组分的定性较为困难。

  K溶 溶 质 质 在 在 固 流 定 动 相 相 中 中 的 的 浓 浓 度 度 ccm s K 只与固定相和温度有关，与两相体积、柱管

  分配比k：： 在必定的温度和压力下，组分在 两相间分配达平衡时，分配在固定相和活动相 中的质量比。

  死体积Vm：不被保存的组分经过色谱柱所消 耗的活动相的体积，又指色谱柱中未被固定相 所占有的空地体积（包含色谱仪中的 管路、连 接头的空间、检测器的空间）。

  从进样到被测组分流出色谱柱进入检测 器接连测定，得到的检测信号随时刻改变 的曲线称为色谱流出曲线或色谱图。

  1．基线：操作条件安稳 后，无样品经过期检测器 所反映的信号一时刻曲线。

  它反映检测器体系噪 声随时刻改变。安稳的基 线．色谱峰：从被测组分开端步入检测器至

  峰面积（A）：由色谱峰与基线之间所围成的面积 称为峰面积。定量剖析的根本根据。

  在相同的色谱操作条件下取得的色谱峰 的区域宽度值越小，阐明色谱柱的别离 效能越好，柱效越高。

  分配系数K： 组分在固定相和活动相之间的 分配处于平衡状况时，在两相中的浓度之比。

  半峰宽W1/2 ：色谱峰高一半处的宽度。 峰底宽W：从色谱峰两边拐点上的切线与基线交点之

  间的间隔，也称基线宽度。 标准偏差 ：峰高(h)的0.607倍处色谱峰宽度的一半。

  固定相——在色谱柱中固定不动的相。能够 是固体，还能够是液体。 活动相——带着试样混合物流过固定相的流 体，是液体或气体。 色谱柱——承载固定相的设备。各种原料和 尺度。 被别离组分——不再仅局限于有色物质

  ➢ 分配色谱：使用分配系数的不同 ➢ 吸附色谱：使用物理吸附功能的差异 ➢ 离子交换色谱：使用离子交换原理 ➢ 空间排阻色谱：使用排阻效果力的不同

  =Vm/Vs，表明相比率，是柱型特色参数，对 于填充柱，值一般为6~35，关于毛细管柱， 值一般为60~600。

  值的巨细反映了色谱柱对难别离组分对的别离 选择性，值越大，相邻两组分色谱峰相距越远， 色谱柱的别离选择性越高。当等于或挨近1时， 阐明相邻两组分不能别离。

  当活动相中带着的混合物流经固 定相时，其与固定相发生彼此作 用。因为混合物中各组分在性质 和结构上的差异，与固定相之间 发生的效果力的巨细、强弱不同 ，跟着活动相的移动，混合物在 两相间经过重复屡次的分配平衡 ，使得各组分被固定相保存的时 间不同，然后按必定次第由固定 相中流出。

  调整保存体积V R ：保存体积与死体积之差，即组分 停留在固定相时所耗费活动相的体积

  准组分S的调整保存时刻之比。相对保存值只与柱 温文固定相性质有关，与其他色谱操作条件无关， 色谱定性剖析的重要参数 。

  保存时刻tM：不与固定相效果的物质从进样到出 现峰极大值时的时刻。 保存时刻tR：试样从进样到呈现峰极大值时的时 间。它包含组份随活动相经过柱子的时刻 tM和组 份在固定相中停留的时刻。

  后调的整保保存留时时刻间，t R 它：是某组组份份在的固保定留相时中心的扣滞除留死时时刻间。

  ➢了解色谱剖析中的根本术语; ➢了解色谱剖析中的塔板理论和速率理论; ➢了解影响色谱柱柱效、别离度的要素; ➢了解色谱剖析中的定性和定量办法。

  ➢娴熟校对因子的核算方法; ➢把握归一化法、内标法的定量核算方法; ➢把握外标法，娴熟制作外标法作业曲线